Acople del pool de vesículas inmediatamente liberable (IRP) con los canales de Ca2+ tipo P/Q y límites funcionales de este pool en células cromafines.

Format:

Book

Author/Creator:

Álvarez, Yanina Daniela.

Contributor:

Marengo, Fernando Diego.

Language:

Spanish

Physical Description:

1 online resource (185 pages)

Place of Publication:

Buenos Aires : B - Universidad de Buenos Aires, 2011.

Contents:

Acople del pool de vesículas inmediatamente liberable (IRP) con los canales (...)

Resumen

Abstract

Agradecimientos

Dedicatoria

Lista de abreviaturas

Índice

1 Introducción

1.1 Médula Adrenal y Células Cromafines

1.1.1 Generalidades

1.1.2 Potencial de acción

1.1.3 Las catecolaminas están empaquetadas en vesículas

1.1.4 La médula adrenal y la respuesta al estrés

1.1.5 Ventajas como modelo neurobiológico

1.2 Señales de calcio en células cromafines

1.2.1 Fuentes extracelulares de calcio

1.2.1.1 Canales de calcio

1.2.2 Fuentes intracelulares de calcio

1.2.3 Sistemas de remoción y regulación del calcio citosólico

1.2.4 Características espaciales y temporales de las señales de calcio

1.3 Exocitosis en células cromafines

1.4 La cinética de la respuesta secretoria y su asociación con los grupos de vesículas

1.5 EL IRP

1.6 Acople entre los canales de calcio y las vesículas secretorias

1.7 Endocitosis

1.7.1 Endocitosis lenta

1.7.2 Endocitosis rápida

1.8 Ciclado vesicular, recuperación y regulación del IRP

2 Resultadoos preliminares a esta tesis

2.Tipos de canales de calcio asociados al IRP

3 Objetivos

3.1 Objetivo general

3.1.1Objetivos particulares

4 Materiales y métodos

4.1 Cultivo y transfección de células cromafines

4.1.1 Soluciones de cultivo y transfección

4.1.2 Procedimiento para el cultivo

4.1.3 Procedimiento para la transfección

4.2 Técnica patch clamp

4.2.1 Generalidades

4.2.2 Circuito equivalente de la célula y medición de capacitancia celular

4.2.3 Métodos para calcular los componentes del circuito equivalente

4.2.4 Dispositivo de patch clamp

4.2.5 Preparación de micropipetas

4.2.6 Soluciones experimentales para los experimentos de patch clamp.

4.2.7 Protocolos de estimulación utilizados para la medición de la capacitancia celular

4.2.7.1 Protocolo de pulsos pareados

4.3 Técnica de imaging con FM

4.3.1 Características del los fluofóforos tipo FM

4.3.2 Dispositivo experimental

4.3.3 Soluciones utilizadas

4.3.4 Protocolo básico para la medición de exocitosis

4.4 Análisis de datos y estadística

4.4.1 Procesamiento de los experimentos electrofisiológicos

4.4.2 Procesamiento de los experimentos de Imaging

4.4.3 Estadística

4.5 Reactivos y químicos

4.6 Simulaciones computacionales

4.6.1 Geometría

4.6.2 Simulación de las corrientes de calcio

4.6.3 Dinámica del calcio: Difusión y reacción con los buffers

4.6.4 Exocitosis

5 Resultados y discución

5.1 Características del IRP

5.1.1 Estimación del IRP

5.1.2 Efecto del buffer rápido BAPTA sobre la exocitosis de las vesículas del IRP

5.1.3 Efecto de BAPTA sobre la exocitosis de las vesículas poco acopladas al estímulo

5.1.4 Trenes de despolarizaciones: Componentes altamente y pobremente acoplados

5.1.5 Discusión

5.2 Canales de calcio asociados al IRP

5.2.1 Discusión

5.3 Mecanismo de acople entre canales P/Q y las vesículas del IRP

5.3.1 Exocitosis del IRP en células transfectadas con synprint

5.3.2 Efecto de la transfección con synprint sobre las corrientes de calcio

5.3.3 Respuesta exocitótica a trenes de despolarizaciones en células transfectadas (...)

5.3.4 Efecto de la transfección con synprint sobre la exocitosis masiva medida (...)

5.3.5 Discusión

5.4 Participación del IRP en el rango de frecuencias fisiológicas de disparo (...)

5.4.1 Recuperación del IRP

5.4.2 Efecto de la concentración de calcio citosólica sobre el IRP

5.4.3 Papel regulador del calcio citosólico sobre la velocidad de recuperación.

5.4.4 Exocitosis en respuesta a despolarizaciones que simulan potenciales de acción

5.4.5 Recuperación del PPA

5.4.6 Endocitosis frente a un PAs

5.4.7 Discusión

5.5 Trenes de potenciales de acción

5.5.1 Trenes a baja frecuencia

5.5.2 Trenes a alta frecuencia

5.5.3 Discusión

6 Discución final

Anexo:Simulaciones computacionales

A.1 Condiciones iniciales

A.1.1 Corrientes de calcio

A.1.2 Buffers

A.2 Simulaciones

A.2.1 Exocitosis del IRP

A.2.2 Efecto del synprint sobre la exocitosis del IRP

Referencias.

Notes:

Description based on publisher supplied metadata and other sources.

OCLC:

951192600