Generación y análisis de ratones genéticamente modificados en los genes chrna9 y chrna10.

Format:

Book

Author/Creator:

Taranda, Julián.

Contributor:

Elgoyhen, Ana Belén.

Language:

Spanish

Physical Description:

1 online resource (118 pages)

Place of Publication:

Buenos Aires : B - Universidad de Buenos Aires, 2009.

Contents:

GENERACIÓN Y ANÁLISIS DE RATONES GENETICAMENTE (...)

Resumen

Abstract

Agradecimientos

Dedicatoria

Abreviaturas

Índice

1. Introducción

1.2 El oído: estructura general y función

1.3 El órgano de Corti y la transducción de señales auditivas

1.4 Inervación de las células ciliadas de la cóclea (...)

1.5 La función de las CCEs se encuentra bajo la influencia (...)

1.6 Receptores colinérgicos

1.6.1 Los receptores colinérgicos nicotínicos

1.7 Estructura primaria del receptor colinérgico en las CCEs

1.7.1 Estudio de mutaciones puntuales en la región del poro (...)

1.8 Importancia del receptor colinérgico nicotínico (...)

1.9 Estudios no invasivos de la función auditiva en ratones

1.9.1 Audiometría: respuestas eléctricas evocadas (...)

1.9.2 Producto de Distorsión de Emisiones (...)

2. Objetivos

2.1 Objetivos Parte I

2.2 Objetivo Parte II

3. Materiales y Métodos

Parte I

3.1 Generación del animal knock in Chrna9 L9'T

3.1.1 Estrategia para la construcción del vector (...)

3.2 Técnicas de biología molecular empleadas

3.2.1 Cortes con enzimas de restricción y aislamiento (...)

3.2.2 Generación de extremos romos

3.2.3 Defosforilación de vectores

3.2.4 Reacciones de ligación

3.2.5 Preparación de bacterias competentes

3.2.6 Transformación de células competentes

3.2.7 Identificación de colonias con el producto (...)

3.2.8 Proceso de recombinación homóloga, selección (...)

3.2.9 Preparación de ADN de ES

3.2.10 Análisis de Southern blot para identificar el evento (...)

3.2.11 Hibridación con una sonda de ADN marcada

3.2.12 Inyección de células ES en blastocistos de ratón (...)

3.2.13 Identificación de ratones fundadores

3.2.14 Animales y bioterio

3.2.15 Extracción de ADN de segmentos de cola (...).

3.2.16 Genotipificación de animales knock in Chrna9 L9'T

3.3 Análisis del animal knock in Chrna9 L9'T

3.3.1 Análisis de la expresión de genes en el Chrna9L9'T

3.3.2 Secciones de plástico para el análisis del ducto coclear

3.3.2.1 Perfusión de los animales

3.3.2.2 Osmicatización

3.3.2.3 Descalcificación

3.3.2.4 Deshidratación

3.3.2.5 Tratamiento en araldita

3.5 Disección coclear e inmunofluorescencia

3.6 Análisis auditivos

3.6.1 Respuestas eléctricas evocadas del tronco encefálico (...)

3.6.2 Producto de Distorsión de Emisiones (...)

3.6.3 Ensayo de la actividad de la inervación (...)

3.6.4 Trauma acústico

Parte II

3.7 Generación del animal transgénico Pou4f3- a10

3.7.1 Estrategia para la construcción del vector (...)

3.7.2 Preparación del transgén para la microinyección (...)

3.7.3 Generación del animal transgénico

3.7.4 Animales y bioterio

3.7.5 Genotipificación de animales

3.7.6 Reacción de la polimerasa con transcriptasa (...)

3.8 Hibridización in situ para la detección del mensajero (...)

3.8.1 Preparación del tejido

3.8.2 Preparación de la sonda

3.8.3 Síntesis de la ribosonda

3.8.4 Hibridación

3.8.5 Preparado de la ribosonda e hibridación

3.8.6 Post-hibridación

3.8.7 Incubación y visualización

3.9 Cruzamientos para el rescate del fenotipo del knock (...)

4.1 Generación y análisis de un ratón con una mutación (...)

4.1.1 Introducción General

4.1.2 Generación de un ratón knock in Chrna9 L9'T

4.1.3 Análisis de la expresión de genes que participan (...)

4.1.4 Análisis histológico del ducto coclear

4.1.5 Análisis electrofisiológico de células ciliadas

4.1.6 Anatomía de la inervación eferente en el animal (...)

4.1.7 Análisis de la fisiología del sistema eferente medial.

4.1.7.1 Incremento del umbral auditivo medido mediante (...)

4.1.7.2 Estudio de la actividad del MOC

4.1.7.3 Análisis de trauma acústico

4.2 Expresión constitutiva de la subunidad a10 (...)

4.2.1 Introducción General

4.2.2 Generación de un ratón que expresa la subunidad (...)

4.2.3 Rescate funcional del nAChR a9a10 en el ratón (...)

5. Discusión

5.1. Aporte general del trabajo

5.1.1 Análisis de la expresión de genes involucrados (...)

5.1.2 Efectos funcionales de la mutación del receptor (...)

5.1.3 Fisiología auditiva en el knock in Chrna9 L9'T

5.2 Expresión constitutiva de la subunidad a10 (...)

5.2.1 Análisis de la presencia de la corriente colinérgica (...)

6. Conclusión

6.1 Conclusión

6.2 Conclusión

7. Anexo

7.1 Rescate funcional del nAChR a9a10 en el ratón (...)

7.2 Análisis funcional del nAChR a9a10 en el Pou4f3 (...)

8. Bibliografía.

Notes:

Description based on publisher supplied metadata and other sources.

OCLC:

951192700