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Mecanismos de proliferación dependientes del estado redox celular.

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Format:
Book
Author/Creator:
Antico Arciuch, Valeria Gabriela.
Contributor:
Poderoso, Juan José.
Language:
Spanish
Physical Description:
1 online resource (183 pages)
Place of Publication:
Buenos Aires : B - Universidad de Buenos Aires, 2009.
Contents:
Mecanismos de proliferación dependientes del estado redox celular: rol de AKT y otras kinasas (...)
Resumen
Abstract
Agradecimientos
Índice
Introducción
La mitocondria
Especies reactivas del oxígeno en la mitocondria
Transducción de señales y evolución del kinoma
Akt/Proteín-kinasa B
La cascada MEK/ERK
H2O2 en la señalización celular
Objetivos
Hipótesis y Objetivos
Materiales y Métodos
Líneas celulares y condiciones de cultivo
Obtención de las fracciones nuclear, mitocondrial y citosólica decélulas en cultivo
Fraccionamiento submitocondrial
Medición de proteínas por el método de Bradford
Medición de la actividad de Lactato dehidrogenasa
Medición de la actividad de Citocromo c oxidasa (Complejo IV)
Preparación de citocromo c reducido
Ensayo de proliferación
Determinación del contenido de ADN por citometría de flujo
Detección de apoptosis por citometría de flujo
Análisis de muerte celular por microscopía de fluorescencia (dobletinción (...)
Determinación espectrofluorométrica del potencial de membranamitocondrial
Medición del potencial de membrana mitocondrial por citometría deflujo
Western blot
Transfección transiente
Ensayo de actividad de Akt
Ensayo de interacción Akt1-P-PDK1
Ensayo de fosforilación y translocación de Akt1 a mitocondriain vitro
Purificación de vesículas de membrana plasmática
Ensayo de fosforilación de Akt1 en presencia de mitoplastos yvesículas
Microscopía confocal
Espectrometría de masa
Producción intracelular de H2O2
Animales
Generación de los tumores
Electroporación in vivo de los tumores
Aislamiento y purificación de mitocondrias a partir de tumores
Materiales
Análisis de los datos
Resultados
Primera Parte
El destino celular depende del estado redox.
Cinéticas de activación y redistribución de Akt1 ante diferentesestados redox
El H2O2 modula la interacción Akt1-P-PDK1 y por lo tanto sucompleta activación en la mitocondria
El tráfico de Akt1 al núcleo requiere la fosforilación en Thr308 enla mitocondria
Akt1 requiere ser fosforilada en Ser473 para translocar a lamitocondria "ex vivo"
La mitocondria y la membrana plasmática cooperan para laactivación completa de Akt1 in vitro (...)
Las Cys60 y Cys310 son los blancos principales para la oxidaciónde Akt1 por H2O2
Segunda Parte
El H2O2 modula la interacción MEK1/2-ERK1/2 y la translocaciónal núcleo
Los tioles de las cisteínas de ERK2, p38 y JNK2 son oxidadosespecíficamente por H2O2
La interacción ERK-MEK y la transferencia de ERK1/2 al núcleodependen de la oxidación (...)
Tercera Parte
El sistema de Trx modula el destino celular a través de la regulacióndel nivel de H2O2
El sistema de Trx provoca una activación selectiva en el eje centralde Akt1 en el modelo (...)
Discusión y conclusiones
Discusión
Conclusiones
Direcciones futuras
Trabajos publicados y Premios
Referencias.
Notes:
Description based on publisher supplied metadata and other sources.
OCLC:
951192629

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