Complementacion de baculovirus que no forman cuerpos de oclusion mediante lineas celulares establemente transformadas con el gen poliedrina [recurso electronico] / Maria Gabriela Lopez ; director : Oscar Taboga.

Format:

Book

Author/Creator:

Lopez, Maria Gabriela.

Contributor:

Taboga, Oscar, dir.

Language:

Spanish

Subjects (All):

Biologia.

Biologia molecular.

Biology.

Molecular biology.

Local Subjects:

Biologia.

Biologia molecular.

Biology.

Molecular biology.

Physical Description:

136 p.

Place of Publication:

Buenos Aires, Argentina : Universidad de Buenos Aires, 2010.

Summary:

Los baculovirus son un grupo diverso de virus que infectan artropodos. AcMNPV presenta un ciclo de vida bifasico, con dos fenotipos virales: los virus brotantes y los virus derivados de los cuerpos de oclusion (ODV). Los ODV, responsables de la infeccion primaria, se embeben en una matriz de poliedrina, proteina que no es esencial para la propagacion de los virus en cultivos celulares. Este trabajo de tesis tuvo como objetivo desarrollar una linea transformada de insecto empaquetadora de baculovirus defectivos en poliedrina, bajo la hipotesis de que es posible complementar esta deficiencia en trans desde el genoma celular. Para ello, en primer lugar, se evaluaron diferentes secuencias regulatorias del promotor del gen poliedrina controlando el gen reportero CAT, en ensayos de transfeccion transitoria. Luego de la infeccion con un baculovirus occ-, los mayores niveles de actividad reportera se obtuvieron con una region regulatoria de 2.735 pb que incluye el promotor minimo de poliedrina y secuencias con funciones de enhancer de la transcripcion en baculovirus (hr1, AcSp). Esta region fue seleccionada para regular la transcripcion de poliedrina en las lineas establemente transformadas. La infeccion de una de estas lineas, Sf9POL, demostro que la morfogenesis de poliedros ocurre de manera similar a la de la infeccion natural y los baculovirus resultantes mostraron ademas una infectividad similar a los salvajes, en larvas de Rachiplusia nu. Las larvas infectadas oralmente mostraron solo una progenie viral de genotipo pol- y fenotipo occ-, incapaz de propagar la infeccion por vias naturales. Colateralmente, se describe una mutacion en la posicion 130 del gen poliedrina, responsable de alteraciones en tamano, morfologia y capacidad de oclusion de poliedros. En conjunto, los resultados y conclusiones de este trabajo contribuyen al conocimiento de los mecanismos de morfogenesis de los cuerpos de oclusion en el baculovirus AcMNPV, con importantes implicancias en el diseno de baculovirus recombinantes para el control de plagas y la produccion de proteinas recombinantes en larvas de lepidopteros.

Notes:

Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el area de Ciencias Biologicas.

OCLC:

820821482