Participacion de factores de transcripcion de la familia Rel/NF-kappa B en procesos de plasticidad y memoria / Ramiro A.M. Freudenthal ; director: Arturo G. Romano.

Format:

Book

Thesis/Dissertation

Author/Creator:

Freudenthal, Ramiro A. M.

Contributor:

Romano, Arturo G, dir.

Language:

Spanish

Subjects (All):

Biologia.

Neurociencias.

Biology.

Neurosciences.

Local Subjects:

Biologia.

Neurociencias.

Physical Description:

151 p.

Place of Publication:

Buenos Aires, Argentina : Universidad de Buenos Aires, 2006.

Summary:

La memoria de largo termino y la plasticidad neuronal comparten varias caracteristicas,incluyendo las fases temporales de mecanismos celulares y moleculares: la induccion requiere de un aumento de calcio intracelular, la persistencia temprana depende de la activacion de quinasas y las etapas tardias necesitan de transcripcion genica y de la sintesis de proteinas. Desde los primeros experimentos en los cuales se logro amnesia inhibiendo la sintesis proteica, se especula acerca de la funcion de factores de transcripcion (FT) especificos, en la regulacion de la expresion genica necesaria para la perdurabilidad tanto de fenomenos mnesicos como de la plasticidad neuronal. Este trabajo se concentro en dos aspectos de la funcion del FT NF-kappa B en la consolidacion de la memoria de largo termino y la plasticidad neuronal. El primer aspecto se refiere a la activacion del FT luego de inducidos estos fenomenos, y el segundo a la conservacion evolutiva de la funcion de esta via de transduccion desde crustaceos a mamiferos. Para los propositos de este trabajo se evaluo la activacion de este FT en tres modelos: la consolidacion de la memoria de largo termina (MLT) en el cangrejo Chasmagnathus granulatus, un paradigma evitacion inhibitoria en raton y la induccion de potenciacion de largo termino in vivo de la via perforante del hipocampo de raton. La presencia de la via de regulacion transcripcional Rel/NF-kappa B, se determino en el cangrejo por retardo electroforetico (EMSA), Western Blot, inmunoprecipitacion, union covalente con irradiacion ultravioleta e inmunohistoquimica. En el cangrejo, un protocolo que induce una MLT es seguido por una activacion bifasica de union al ADN por parte del NF-kappa B, mientras que un protocolo que induce una memoria de corto termino no activa al FT. NF-kappa B se encuentra presente en las terminales sinapticas, en donde es activado por protocolos de entrenamiento que inducen MLT. El curso temporal de la activacion de NF-kappa B nuclear en hipocampo, se estudio por EMSA, despues del entrenamiento de un ensayo, en el paradigma de evitacion inhibitoria en raton. Mostrando, cuando se lo comparo con los animales naive, una inhibicion del FT luego de 15 min. del entrenamiento seguida por una activacion a los 45 min. tanto en los animales que sufrieron un shock electrico, como en los que fueron expuestos al contexto sin shock. En esta misma linea argumental, encontramos que la inyeccion intra cerebro ventricular (icv) de sulfasalazina inmediatamente post-entrenamiento impide la formacion de la memoria de largo termino. Mas aun, una segunda estrategia independiente para inhibir el NF-kappa B en el cerebro, la administracion icv de un oligonucleotido doble cadena de ADN conteniendo la secuencia consenso de NF-kappa B (kB Decoy) tambien resulta amnesica. Cuando se estudian los EMSAs de extractos nucleares de hipocampo de raton, se observa que animales tetanizados (protocolo inductor de potenciacion de largo termino) muestran, luego de 15 min. un aumento en la actividad de union al ADN, cuando son comparados con, animales estimulados a baja frecuencia (EBF) y animales naive. Los hipocampos al ser analizados por inmunohistoquimica con un anticuerpo contra la forma activa del factor, muestran la misma tendencia general pero con patrones celulares de activacion mas complejos. Estos resultados indican, primero que la actividad de union al ADN del NF-kappa B es necesaria para la consolidacion de memorias de largo termino. Y el tratamiento con inhibidores especificos de NF-kappa B, suficiente para generar amnesia en los animales inyectados. A la vez que muestra un patron temporal claramente delimitado en el cual el factor es necesario para la consolidacion. Igualmente significativa es la activacion del FT luego de inducida la plasticidad neuronal, mostrando un papel en el proceso de potenciacion. El segundo aspecto de este trabajo sugiere que la via de transduccion senales de NF-kappa B se encuentra conservada, en su funcion fisiologica en el sistema nervioso, entre invertebrados y vertebrados.

Notes:

Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el area de Ciencias Biologicas.

OCLC:

951196402